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PCR核酸檢測試劑盒是怎么利用PCR技術完成檢測的?
發布時間:2022-11-26   點擊次數:147次
  PCR核酸檢測試劑盒是怎么利用PCR技術完成檢測的? 
  PCR核酸檢測試劑盒檢測原理是以病毒*的基因序列為檢測靶標,通過PCR擴增,使我們的選擇這段靶標DNA序列指數級增加,每一個擴增出來的DNA序列,都可與我們預先加入的一段熒光標記探針結合,產生熒光信號,擴增出來的靶基因越多,累計的熒光信號就越強。所以,核酸檢測,其實就是通過檢測熒光信號的累積來確定樣本中是否有問題。
  PCR核酸檢測試劑盒,PCR就是聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction,PCR),可使特定DNA的片段進行體外快速擴增。什么意思呢?就是用PCR技術,可以把一段DNA序列成千上萬倍地復制粘貼。就是“變性、退火、延伸”這三個步驟的不斷循環。
  具體來說,這三個步驟的實現方法是:
  1、變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,為下輪反應作準備;
  2、退火:退火也叫復性,模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,在這個溫度下,模板DNA單鏈能夠與引物的互補序列配對結合;所謂引物,是一段已經確定好DNA的片段,通過引物找到模板DNA的相應位置,也就是確定了復制的起點;
  3、延伸:DNA模板-引物結合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP(脫氧核糖核苷三磷酸,可構成DNA)為反應原料,靶序列為模板,按照堿基互補配對原則和半保留復制原理,就能合成一條新的與模板DNA鏈互補的復制鏈。
  PCR核酸檢測試劑盒通過提取樣本中的RNA,通過PCR技術,先逆轉錄形成DNA,再對DNA進行擴增,最后以熒光的方式讀取信號。如果PCR檢測到足夠強的信號,那么就可以說樣本中存在問題,反之則說明沒有問題。
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